1、柱溫的波動(dòng)會(huì)導(dǎo)致基線(xiàn)的變化。即使是微小的溫度變化,也可能對(duì)示差檢測(cè)器、電導(dǎo)檢測(cè)器、靈敏度較低的紫外檢測(cè)器或其他光電檢測(cè)器產(chǎn)生影響。
解決方案:調(diào)節(jié)柱子和流動(dòng)相的溫度,并在檢測(cè)器前安裝熱交換器。
2、流動(dòng)相不均勻。(由流動(dòng)相條件變化引起的基線(xiàn)漂移大于由于溫度變化所導(dǎo)致的漂移。)
解決方案:采用HPLC級(jí)別的溶劑、高純度的鹽和添加劑。在使用流動(dòng)相之前需進(jìn)行脫氣,并在使用過(guò)程中配合氦氣。
3、流通池受到污染或存在氣體。
解決方案:使用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑對(duì)流通池進(jìn)行沖洗。如有需要,可以使用1N的硝酸。(請(qǐng)勿使用鹽酸)
4、檢測(cè)器的出口被堵塞。(高壓導(dǎo)致流通池窗口破裂,產(chǎn)生噪音基線(xiàn))
解決方案:移除堵塞物或更換管道。請(qǐng)參考檢測(cè)器手冊(cè),進(jìn)行流通池窗的更換。
5、流動(dòng)相的比例不合適或流速發(fā)生變化。
解決方案:調(diào)整配比或流速。為防止出現(xiàn)此問(wèn)題,可以定期檢查流動(dòng)相的成分和流速。
6、柱子的平衡速度較慢,尤其是在流動(dòng)相發(fā)生變化時(shí)。
解決方案:使用適中濃度的溶劑進(jìn)行清洗。在更換流動(dòng)相時(shí),分析前應(yīng)使用10-20倍體積的新流動(dòng)相對(duì)色譜柱進(jìn)行沖洗。
7、流動(dòng)相受到污染、發(fā)生變質(zhì)或使用低品質(zhì)的溶劑配制。
解決方案:檢查流動(dòng)相的成分,使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑和HPLC級(jí)別的溶劑。
8、樣品中含有強(qiáng)烈保留的物質(zhì)(高K’值),這些物質(zhì)通過(guò)洗脫饅頭峰樣而被分離出來(lái),導(dǎo)致基線(xiàn)逐漸上升。
解決方案:可采用保護(hù)柱,并在進(jìn)樣之間或分析過(guò)程中定期使用強(qiáng)溶劑對(duì)柱子進(jìn)行沖洗。
9、使用循環(huán)溶劑,但檢測(cè)器的設(shè)置尚未調(diào)整。
解決方案:重新調(diào)整基線(xiàn)。當(dāng)檢測(cè)器的動(dòng)態(tài)范圍發(fā)生變化時(shí),需使用新的流動(dòng)相。
10、檢測(cè)器未設(shè)置在最大吸收波長(zhǎng)上。
解決方案:首先,確認(rèn)目標(biāo)化合物的最大吸收波長(zhǎng),并調(diào)整檢測(cè)器的波長(zhǎng)設(shè)置以匹配。若化合物具有多個(gè)吸收峰,選擇信號(hào)最強(qiáng)且基線(xiàn)穩(wěn)定的波長(zhǎng)。同時(shí),檢查光路是否暢通無(wú)阻,確保檢測(cè)器窗口干凈無(wú)污物,必要時(shí)進(jìn)行清潔。此外,對(duì)于使用可變波長(zhǎng)檢測(cè)器的系統(tǒng),建議定期進(jìn)行波長(zhǎng)校準(zhǔn),以確保檢測(cè)準(zhǔn)確度和基線(xiàn)穩(wěn)定性。若調(diào)整后仍存在問(wèn)題,考慮更換更高靈敏度的檢測(cè)器或優(yōu)化色譜條件,如調(diào)整流動(dòng)相組成、流速或柱溫,以進(jìn)一步改善基線(xiàn)表現(xiàn),確保HPLC分析的準(zhǔn)確性和可靠性。